成人免疫细胞
✅ 25~55岁健康成年人： 免疫细胞活性随年龄增长下降，年轻时存储的细胞质量更高，未来可用于抗衰老或疾病治疗。 推荐人群： 长期高压、熬夜、亚健康状态的职场人士。 有肿瘤家族史的高风险人群（提前储备优质免疫细胞）。 免疫力低下人群 不适宜存储的人群 ❌ 活动性传染病患者（如HIV、梅毒、活动性结核）。 ❌ 严重心肝肾衰竭患者（无法耐受细胞采集）。 ❌ 妊娠期女性（避免采血风险）。
标准化存储流程 的关键步骤：
1. 前期准备与样本采集
(1) 供体筛选与评估
健康检查：评估供体健康状况（如传染病筛查、血常规、遗传病风险）。
知情同意：签署存储协议，明确用途（自用/科研/捐赠）。
2. 细胞分离与制备
(1) 样本处理
抗凝处理：血液样本用EDTA或肝素抗凝。
密度梯度离心（如Ficoll法）：分离目标细胞（如PBMC、干细胞）。
红细胞裂解（可选）：去除红细胞杂质。
(2) 细胞分选（可选）
磁珠分选（MACS）：CD34+干细胞、NK细胞等。
流式细胞术（FACS）：高纯度分选（如CD3+CD56+ CIK细胞）。
(3) 质量检测
细胞计数与活力：台盼蓝染色（活力需＞90%）。
无菌检测：细菌/真菌培养、支原体检测。
表型鉴定：流式检测标志物（如CD34+、CD14+）。
3. 细胞冻存
(1) 冻存液配制
基础培养基：如RPMI 1640、DMEM。
冷冻保护剂：
DMSO（5-10%）：防止冰晶损伤（需缓慢添加避免细胞应激）。
血清（如FBS，20%）：提供营养和保护。
(2) 程序降温
4℃平衡：10-15分钟。
程控降温仪：以 -1℃/分钟 降至-80℃。
液氮长期保存：转移至 气相液氮（-150℃~-196℃）或 液相液氮（-196℃）。
替代方案：无程序降温仪时，可用异丙醇冻存盒（-80℃过渡24小时后转液氮）。
4. 存储管理与监测
(1) 存储条件
液氮罐：定期补充液氮，避免温度波动。
备份存储：多罐分装，防止意外损坏。
(2) 定期检测
细胞复苏测试（每年1次）：检测活力与功能（如增殖、分化能力）。
污染监测：微生物检测。
5. 细胞复苏与使用
(1) 快速复苏
从液氮中取出冻存管，立即置入 37℃水浴（1-2分钟内融化）。
缓慢加入预温培养基稀释DMSO。
离心去除冻存液，重悬后接种培养。
(2) 应用方向
临床治疗：CAR-T、NK细胞疗法、干细胞移植。
科研：药物筛选、疾病模型构建。
